产品名称:谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(GPT/ALT)测试盒
产品规格:50管/24样,100管/48样
产品货号:YX-C-A900,YX-W-A900
免费咨询:0551-66107970
货号 |
产品名称 |
检测方法 |
规格 |
售价(元) |
YX-C-A900 |
谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(GPT/ALT)测试盒 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
120 |
YX-W-A900 |
谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(GPT/ALT)测试盒 |
微量法 |
100管/48样 |
180 |
提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 3.5 mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 3.5 mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:液体 30 mL×1 瓶,4℃保存;
标准品:液体 1mL×1 支,20µmol/mL 丙酮酸钠标准品,4℃保存。
产品说明:
GPT(EC 2.6.1.2)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化氨基酸和酮酸转氨基反应,在氨基酸代谢中具有重要作用。此外,哺乳动物肝细胞 GPT 活性很高,当肝细胞坏死,GPT 释放到血液中,血清 GPT 活性显著增高。因此,GPT 被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。
GPT 催化丙氨酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应,生成丙酮酸和谷氨酸;加入 2,4-二硝基苯肼溶液,不仅终止上述反应,而且与酮酸中的羰基加成,生成丙酮酸苯腙;苯腙在碱性条件下呈红棕色,可以在 505nm 读取吸光值并计算酶活力。
试验中所需的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样品测定的准备
1、 细胞或细菌的制备 :
先收集细胞或细菌样品到离心管内,弃上清,按照每 500 万细胞或细菌加入 1mL 提取液,超声波破碎细胞或细菌(功率 20%,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次)。3500g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、组织:称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液进冰浴行匀浆。3500g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)样品:直接检测。
二、测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 505nm,蒸馏水调零。
2、 标准曲线的测定
首先将标准品稀释至 2µmol/mL,按下表混合标准品和试剂一得到浓度梯度标准管:
标准品(µL) |
试剂一(µL) |
标准管浓度(µmol/mL) |
22.5 |
7.5 |
1.5 |
15 |
15 |
1 |
12 |
18 |
0.8 |
6 |
24 |
0.4 |
3 |
27 |
0.2 |
1.5 |
28.5 |
0.1 |
0.75 |
29.25 |
0.05 |
0 |
30 |
0 |
试剂名称(µL)
测定管
对照管
标准管
待测样本
5
试剂一
25
25
标准液
30
混匀后,37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热 30min
试剂二 |
25 |
25 |
25 |
待测样本 |
|
5 |
|
混匀后,37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)准确反应 20min
试剂三 |
240 |
240 |
240 |
混匀,室温放置 10min,在 505nm 波长处测各管吸光度。
注:0µmol/mL 标准管为空白管。V 样本:样本体积,0.005mL;V 试剂一:试剂一体积,0.025mL;V 样总:提取液体积,1mL;W:样本鲜重,g;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;T:反应时间,0.5h;500:细胞或细菌总数,万。
相关新闻: |
版权所有 © 合肥莱尔生物科技有限公司 皖ICP备17006278号-2