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产品名称:尿素氮(BUN)测试盒

产品规格:50管/24样,100管/48样

产品货号:LE-1-307,LE-2-307

产品报价:

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

LE-1-307

尿素氮(BUN)测试盒

可见分光光度法

50管/24样

70

LE-2-307

尿素氮(BUN)测试盒

微量法

100管/48样

100

尿素氮(BUN)含量检测试剂盒说明书(微量法)

产品内容:

试剂一:粉剂×2瓶,4℃避光保存,临用前加2mL蒸馏水充分溶解。

试剂二:液体6mL×1瓶,4℃保存。

试剂三A 液:液体 0.4mL×1 支,4℃保存;

试剂三B 液:液体1.6 mL ×1 瓶, 4℃保存;临用前将A 液倒入B 液中混合,或者根据比例(A:B=1:4)现用现配;

试剂四:液体 2mL×1 瓶,4℃避光保存。

标准品:粉剂×1 瓶,4℃保存。10mg 尿素。临用前加入 4.66mL 蒸馏水配制成 1mg/mL 尿素氮标准液。

产品说明:

尿素(BUN)是人体蛋白质代谢的主要终末产物,BUN构成了血液中绝大部分的非蛋白质氮, 血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N,生成的蓝色靛酚和尿素氮的浓度成正比

自备实验用品及仪器:

可见分光光度计/酶标仪、天平、研钵/匀浆器、低温离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

操作步骤:

一、样品处理

1、组织:按照质量g):蒸馏水体积(mL) 1:5-10  的比例(建议称取约0.1g,加入1mL蒸馏水),冰上匀浆后于4℃,13000g 离心15min,取上清待测。

2、细胞:按照细胞数量(104个):蒸馏水体积(mL)为500-1000:1 的比例(建议500万个细胞加入1mL 蒸馏水),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3 s,间隔7 s,总时间3min);然后4℃,13000g 离心15min,取上清置于冰上待测。

3、血清(浆)或其它液体:直接检测。

二、测定操作:

1、分光光度计/酶标仪预热 30min,波长调至 630nm,分光光度计蒸馏水调零。

2、将 1mg/mL 尿素氮标准液用蒸馏水稀释至 50μg/mL 备用。

3、加样表:

试剂名称(μL)

空白管

标准管

测定管

对照管

样品

 

 

12

12

标准品

 

12

 

-

蒸馏水

12

 

 

24

试剂一

24

24

24

-

试剂二

44

44

44

44

充分混匀,于 37℃反应 10min,

试剂三

16

16

16

16

试剂四

12

12

12

12

混匀,室温静止 30min。

蒸馏水

92

92

92

92

充分混匀后测定 630nm 处吸光值,记为 A 空白管、A 标准管、A 测定管和 A 对照管。计算

ΔA 标准=A 标准管-A 空白管,ΔA 测定=A 测定管-A 对照管。

三、计算公式:

1、按样本质量计算:

尿素氮含量(μg/g)= ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷W

=50×ΔA测定÷ΔA标准÷W。

2、按蛋白浓度计算:

尿素氮含量(μg/mg prot)=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷(Cpr×V提取)

=50×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr。

3、按细胞数计算:

尿素氮含量(μg/104 cell)= ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷细胞数量

=50×ΔA测定÷ΔA标准÷细胞数量。

4、按液体体积计算:

尿素氮含量(mg/mL)=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品

=50×ΔA测定÷ΔA标准。

C标准品:标准品浓度,50μg/mL;V提取:提取液体积,1mL;W:样品质量,g;Cpr:样品蛋白浓度,mg/mL;细胞数量:以万计。

注意事项:

1、配制好的试剂一在2-8℃条件下可保存一周。

2、ΔA测定大于1或者A测定管大于1时,建议将样品用蒸馏水稀释后在进行测定。


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