试剂一：10mL×1  瓶，-20℃保存。

试剂二：10mL×1  瓶，-20℃保存。

试剂三：粉剂×2  瓶，-20℃保存。用时每瓶加入5mL蒸馏水充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存。

试剂四：10mL×1  瓶，4℃保存。

产品说明：

GS（EC 6.3.1.2）主要存在于植物中，是生物体内氨同化的关键酶之一，催化铵离子和谷氨 酸合成谷氨酰胺，不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性，而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。

GS在ATP和Mg2+存在下，催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺； 谷氨酰胺进一步转化为γ─谷 氨酰基异羟肟酸，在酸性条件下与铁形成红色的络合物； 该络合物在540nm处有最大吸收峰， 可用分光光度计测定。

所需的仪器和用品：

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸 馏水。

操作步骤：

一、样本测定的准备

1 、 细菌、细胞或组织样品的制备：

细菌或培养细胞： 先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清； 按照细菌或细胞数量（10⁴ 个） ：提取液体积（ mL）为500~1000：1  的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液） ， 超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W ，超声3s ，间隔10s ，重复30次） ；8000g 4℃ 离心10min ，取上清，置冰上待测。

组织： 按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10  的比例（建议称取约0.1g  组织， 加入1mL  提取液） ，进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min ，取上清，置冰上待测。

2 、 血清（浆） 样品： 直接检测。

二、测定步骤

1 、 分光光度计预热30min 以上，调节波长至540nm ，蒸馏水调零。

2 、 在EP 管中加入下列试剂：